二手高效液相色譜儀是通過(guò)將混合物的組分溶解、分配或吸附在固定相和流動(dòng)相中的不同而使組分在相對(duì)運(yùn)動(dòng)過(guò)程中多次受到上述各力的作用,從而達(dá)到相互分離的目的。HPLC廣泛應(yīng)用于食品分析,環(huán)境分析,生命科學(xué),醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),無(wú)機(jī)分析。一般情況下,80%-85%的有機(jī)物可以采用二手HPLC。
1、輸液系統(tǒng)
包括溶劑柜、真空脫氣機(jī)、溶劑混合器、高壓泵等,其中核心部分是泵;泵的作用提供足夠的驅(qū)動(dòng)力使流動(dòng)相通過(guò)填充緊密的色譜柱。
洗脫方式也分為兩種:
?。?)等度洗脫:在同一分析周期內(nèi)流動(dòng)相組成保持恒定,適合于組分?jǐn)?shù)目較少,性質(zhì)差別不大的樣品。
?。?)梯度洗脫:采用兩種(或多種)不同極性的溶劑,在分離過(guò)程中按一定程序連續(xù)改變流動(dòng)相的濃度配比和極性的一種洗脫模式。用于分析組分?jǐn)?shù)目多、性質(zhì)差異較大的復(fù)雜樣品。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
把分析試樣有效地送入色譜柱進(jìn)行分離。一般有自動(dòng)進(jìn)樣器和手動(dòng)進(jìn)樣器,進(jìn)樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的5-10倍(最少3倍)。
3、分離系統(tǒng)
主要是色譜柱,色譜柱是一根裝滿(mǎn)填料的管子。色譜柱的材料有不銹鋼、塑料、玻璃等,其尺寸(內(nèi)徑、長(zhǎng)短)不盡相同;色譜柱填料主要有硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì),填料的粒徑不盡相同。
4、檢測(cè)器
對(duì)檢測(cè)器的要求:靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬、死體積小、對(duì)溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差檢測(cè)器等。